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Clustered Regularly-Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas9|CRISPR/Cas9
CRISPR / Cas9（聚簇有规律间隔的短回文重复序列/ Cas9）是一种细菌免疫系统，已经适应了哺乳动物细胞中的基因组编辑。 Cas9是一种可编程核酸酶，通过将一个约20个核苷酸的重组“引导RNA”（gRNA）与靶位点结合，在DNA中产生双链断裂（DSB）。 Cas9产生的DSB通常是通过该单元容易出错的非同源末端连接（NHEJ）途径修复的，从而导致了小的插入或缺失（indels）。绝大多数插入缺失会改变阅读框，引入过早的终止密码子或导致无意义的mRNA衰变，从而有效地“敲除”基因。CRISPR / Cas9系统在特定基因编辑方面已做出了巨大的努力，并已成功应用于修饰人类和其他生物的游离基因组。 CRISPR / Cas9系统利用原核RNA引导的可编程核酸酶，该酶可以在前导RNA的指导下在特定位点产生双链DNA断裂（DSB）。 DSB过程取决于两个基本成分的共表达：指导RNA（gRNA）和Cas9核酸酶。制作特定的DSB可以通过容易出错的非同源末端连接（NHEJ）或同源直接修复（HDR）触发DNA修复。在存在CRISPR / Cas9系统的情况下，NHEJ抑制剂SCR7被证明可以在哺乳动物细胞中将Cas9介导的HDR的效率提高至少7倍。通过CRISPR / Cas9进行基因组编辑已成为对活细胞基因组进行精确，有针对性的改变的有效且可靠的方法。
