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测量植物的呼吸速率(广口瓶法, 实验原理,实验仪器与试剂,实验步骤)
Release Time：2020-07-31一、测量植物的呼吸速率实验介绍
测量植物的呼吸速率实验中,呼吸速率是植物生命活动强弱的重要指标之一,常应用在植物生理研究及农业生产实践等领域。测呼吸速率的方法有很多种，但基本介于测定CO2的释放量以及O2的吸收量两大类方法之一。本文实验用罐子法测量植物的呼吸速率，并对植物在不同萌发阶段小麦种子以及幼芽的呼吸速率对比。
二、测量植物的呼吸速率实验原理
在密闭的容器中添加一定量的碱液（通常是Ba（OH）2），然后悬挂植物材料，然后植物材料释放的CO2可以被容器中的Ba（OH）2吸收，然后将剩余的用草酸滴定碱。根据空白样和样品消耗的草酸溶液之间的差异，可以计算出呼吸释放的二氧化碳量。响应如下：
Ba（OH）2 + CO2→BaCO3↓+ H2OBa（OH）2 + CO2→BaCO3↓+ H2O
Ba（OH）2（剩余）+ H2C2O4→BaC2O4↓+ 2H2O
三、测量植物的呼吸速率实验仪器与试剂
2、试剂：1/44 mol / L草酸溶液：精确称量2.8651g重结晶的H2C2O4·2H2O并将其溶解在蒸馏水中，稀释至1000ml，每毫升相当于1mgCO2。
0.05mol / L氢氧化钡溶液：溶于1000ml蒸馏水中的8.6g Ba（OH）2或15.78g Ba（OH）2·8H2O。如果有浑浊，请在溶液澄清后使用。
酚酞指示剂：称取1g酚酞并将其溶于100ml 95％乙醇中，然后将其存储在滴管瓶中。
| 序号 | 产品 | 货号 | CAS号 | 备注 |
| 1 | 草酸 | 144-62-7 | JT22272 | |
| 2 | 氢氧化钡 | 17194-00-2 | WSH40129 | |
| 3 | 酚酞指示剂 | 77-09-8 | HC0247 | |
| 4 | 5%乙醇 | 64-17-5 | JT26000 |
四、测量植物的呼吸速率实验步骤
（一）测量植物的呼吸频率
1.组装广口瓶的呼吸器
取一个500毫升的广口瓶，并添加一个三孔橡胶塞。将装有苏打石灰的干燥管插入一个孔中，以吸收空气中的二氧化碳，以确保在测量呼吸时进入呼吸瓶的空气中没有二氧化碳。将温度计插入一个孔中；另一个孔的直径约为1厘米以进行滴定。使用小的橡胶塞将其紧密塞住。瓶子下方安装了一个小挂钩，用于悬挂一个用尼龙窗纱制成的小篮子，用于存放植物材料。
2.空白滴定
拉出滴定孔上的小橡胶塞，用碱滴定管准确地向瓶中添加20ml的0.05mol / L Ba（OH）2溶液，然后将滴定孔塞紧。充分摇动罐子几分钟。瓶中的二氧化碳完全吸收后，拉出小橡皮塞，加入三滴酚酞，将酸滴定管插入孔中，并用1/44 mol / L的草酸进行空白滴定。记下草酸溶液的量（毫升），即空白滴定值。
3.物质效价的测定
倒出废液，首先使用自来水，然后使用新鲜煮沸（以去除CO2）和冷却的蒸馏水清洁广口瓶，向瓶中加入20ml Ba（OH）2溶液，取100粒小麦种子进行测试，同时称出重量，将其放入小篮子中，打开橡皮塞，迅速将其挂在橡皮塞的钩子上，然后塞上塞子（添加样品时，请尝试防止室内空气和呼吸空气进入。进入瓶子），开始记录时间。 30分钟后，在此期间轻轻摇动几次，以破坏溶液表面的BaCO3膜，这有利于CO2的完全吸收。在计划的时间之后，轻轻打开瓶塞，迅速取出小篮子，然后立即将其重新插入。充分摇晃2分钟以完全吸收瓶中的CO2，拉出小橡胶塞，加入3滴酚酞，并像以前一样用草酸滴定。写下草酸的量，这是样品的滴定值。
4.取出广口瓶中的小麦种子，在80°C的烤箱中干燥并称重干重。
5.计算呼吸频率
呼吸速率=（空白滴定值-样品滴定值）*mg CO2/mg草酸
植物组织鲜重（或干重）*时间（h）
呼吸速率的单位通常可以是mgCO2·100粒﹣1种子·h﹣1，其中滴定值以ml为单位，mgCO2 / ml草酸= 1。
（二）不同状态下植物种子的呼吸速率比较
1.使用3个与上述相同大小的广口瓶（三个实验组可以配合使用），并按照步骤3和4测量以下材料的呼吸速率。
（1）100粒吸取药液膨胀的小麦种子；
（2）发芽的小麦种子100颗；
（3）100个小麦种子，芽长约0.5厘米。
根据测量结果，根据上式计算出鲜重（或干重）的呼吸率。同时，根据以下公式，计算1小时内每100粒小麦种子释放的CO2毫克数。
呼吸速率的单位为：mg CO2·100粒·1种子·h·1。
2.在下表中记录不同处理的测量结果，并进行解释，并比较以三种不同单位表示的种子呼吸速率的差异。
| 呼吸频率测量记录表 | ||||||||||
| 处理编号 | 处理方式 | 材料量 | 测定时间min | 空白滴定值ml | 样品滴定值ml | 呼吸速率 | ||||
| 鲜重 | 干重 | 粒数 | mg（gFW.h） | mg（gDW.h） | mg/100粒-1种子h-1 | |||||
| 1 | 吸胀种子 | |||||||||
| 2 | 萌动种子 | |||||||||
| 3 | 芽长0.5cm种子 | |||||||||
