欢迎来到范德生物BIOFOUNT
范德生物中国
范德生物产品购买购物车
0
搜索

首页 > 新闻咨询 > 聚乙二醇沉淀法检测CIC实验 (实验原理,所需的材料,实验步骤,注意事项,需要的试剂)

聚乙二醇沉淀法检测CIC实验 (实验原理,所需的材料,实验步骤,注意事项,需要的试剂)

Release Time:2020-07-30

一、聚乙二醇沉淀法CIC检测实验原理
聚乙二醇沉淀法检测CIC实验中,PEG具有可以抑制CIC的解离,并可以促进CIC进一步聚合成更大的聚集体后以使其沉淀。向测试的血清中添加低浓度的PEG可以使IC沉淀在血清中。 CIC的存在和含量可以通过比浊法或散射比浊法来测定。

二、聚乙二醇沉淀法CIC检测实验所需材料
硼酸盐缓冲液
※ PEG-NaF稀释剂:量取PEG6000 40.9g,量取NaF 10.0g,溶解于BBS溶液中,加至1000mL,用G3或G4玻璃滤器进行过滤。
热聚合的人IgG:取10ml人IgG(10mg / ml),在搅拌下滴加100uL 1.8%戊二醛,在24h后用100uL 0.4mol/LpH5.4Tris-HCl缓冲液终止反应,通过Sepharose 4B柱,用0.01mol / LpH7.4磷酸盐缓冲液洗脱,并收集第一个蛋白质峰。分装后将牛血清白蛋白添加至0.5%,并储存在-40°C下。

三、聚乙二醇沉淀法CIC检测实验步
1)量取0.15ml待测血清,加0.3ml BBS(1:3稀释);
2)依次加入每种溶液(待测血清的最终稀释度为1:33,PEG的最终浓度为3.64%);
3)将对照管和测试管放在37℃水浴60分钟;
4)用分光光度计在495nm的波长处测量吸光度,并用对照管将其调零。正常人的浊度值的平均值加上2个标准差被认为对CIC是阳性的。

四、聚乙二醇沉淀法CIC检测实验注意事项
1)低密度脂蛋白会导致浊度增加,因此应空腹采集血液;
2)高血脂含量以及标本反复冷冻和融化会在IC测试中引起假阳性

五、聚乙二醇沉淀检测CIC实验试剂清单
序号 产品名 货号 CAS 备注
1 PBS缓冲液 HC2031    
2 硼酸盐缓冲液 HC0810    
3 PEG6000 CG0344 25322-68-3  
4 氟化钠 JT0551 7681-49-4  
5 戊二醛 HC0672    
6 Tris HCl缓冲液 HC2026    
7 牛血清白蛋白 SS2163 9048-46-8  


 
My title page contents