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干细胞成骨诱导实验 （实验简介,所需的材料,实验步骤,注意事项,试剂清单）
Release Time：2020-07-29一、干细胞成骨实验简介
干细胞成骨实验过程中骨代谢是破骨细胞吸收与成骨细胞形成之间的动态平衡过程。成骨细胞负责骨基质的合成,分泌和矿化。它们是激活或终止骨骼重塑的控制器。它们在骨骼组织的修复,骨骼组织的生长和发育以及骨骼质量的平衡中起着重要作用。骨疾病研究的主要重点,例如孔隙率和骨折。
二、干细胞成骨诱导实验所需的材料
磷酸盐缓冲盐溶液,胰蛋白酶,茜素红S染色液,成骨诱导液,蒸馏水,显微镜等。
三、干细胞成骨诱导的实验步骤
（1）用胰蛋白酶消化80％-90％融合的干细胞,接种到六孔板中,每孔大约3x103个细胞,每孔加2ml干细胞培养液体。将其放在37°C,5％CO2的培养箱中进行培养。
（2）24小时后,去除旧培养基,并加入2ml成骨诱导液。
（3）连续观察细胞,更换培养液,连续培养14天。
（4）小心吸出培养液,添加足够的固定剂以固定15分钟。
（5）用磷酸盐缓冲盐溶液清洗每个孔3次,每次3分钟。
（6）加入茜素红S染色液染色30分钟,可根据染色情况增加或减少染色时间。
（7）用蒸馏水洗净染色液。肉眼可见细胞,呈清晰的紫红色。
（8）在光学显微镜下观察并拍照。
四、干细胞成骨诱导实验的注意事项
1.根据钙盐的含量来确定茜素红S的染色时间,一般情况下为30分钟。
2.固定剂极易挥发,使用后应密封保存。
五、干细胞成骨诱导实验试剂清单
| 序号 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | PBS缓冲液 | HC2031 | ||
| 2 | 胰蛋白酶 | SS2236 | 9002-07-7 | |
| 3 | 茜素红S染色液 | HC1933 |
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