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采用Hoechst-PI染色法检测细胞凋亡实验（实验原理,实验介绍,实验步骤,实验所需试剂,实验结论）
Release Time：2020-07-23一，Hoechst-PI染色法检测细胞凋亡实验介绍
Hoechst-PI染色法检测细胞凋亡实验中，Hoechst可以被活细胞吸收并与DNA结合，并在紫外线下显示蓝色荧光。然后PI染色死细胞以产生红色荧光。因此，在细胞的二维直方图上，可以根据红色和蓝色的两种荧光来区分三种类型的细胞：正常的活细胞对染料具有排斥力，而蓝色和红色的荧光较少；凋亡细胞的膜通透性发生变化，主要是摄取Hoechst染料，其表现出强蓝色荧光和弱红色荧光。由于强PI染色和覆盖Hoechest染色，坏死细胞显示出弱蓝色和强红色荧光。
二，Hoechst-PI染色法检测细胞凋亡实验所需的试剂材料
Hoechst 33258储备溶液；碘化丙啶（PI）；0.01mol/L 的PBS缓冲液， pH 7.0?7.2。
三，Hoechst-PI染色法检测细胞凋亡的实验步骤
（1）定期准备单细胞悬液；
（2）加入Hoechst 33258溶液使终浓度为1mg / ml，溶于37℃水7分钟；
（3）在冰上冷却，离心除去染色液，重悬于PBS中。
（4）加入PI染料溶液至终浓度5mg / ml，冰浴；
（5）离心并弃去染色液，用PBS洗涤一次，用流式细胞仪分析，并通过直接激光检测记录400?500nm的蓝色荧光和大于630nm的红色荧光。
四，Hoechst-PI染色法检测细胞凋亡的结论
染色后正常对照细胞显示弱蓝色和弱红色荧光，凋亡细胞则会显示蓝色和弱红色荧光，坏死细胞会显示出强红色和弱蓝色。
五、Hoechst-PI染色法检测细胞凋亡实验试剂清单
| 序号 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | PBS缓冲液 | HC2031 | ||
| 2 | 碘化丙锭（PI) | YZM018808 | 25535-16-4 |
