HE染色法细胞实验知识(实验原理,实验步骤,实验所需试剂)
Release Time:2020-07-23一,细胞HE染色实验原理
细胞HE染色实验中,HE染色法使用碱性染料苏木精和酸性染料曙红两种染料分别作用于细胞核和细胞质,使细胞的精细结构通过颜色改变其折射率,使细胞清晰可见。在光学显微镜图像下显示。 HE染色可提供良好的核质对比染色,是细胞化学染色最常用的方法。
二,细胞HE染色实验所需材料
稀盐酸乙醇溶液,二甲苯,PBS,苏木精染料,乙醇,曙红染料,培养瓶子,培养皿,眼科镊子,盖玻片,载玻片,显微镜和其他材料。
三,细胞HE染色实验操作步骤
1.实验样品的制备
对于贴壁细胞,用胰蛋白酶消化,调节至适当的细胞浓度,然后滴在盖玻片上。培养相应的时间后,取出细胞玻片并用PBS洗涤3次。
2.实验样品固定事项
样品用乙醇固定20分钟,然后用PBS洗涤两次,每次1分钟。
3.成核
用苏木精染料将样品染色2至3分钟,然后用自来水洗涤。
4.分离
将样品放在显微镜下观察。如果细胞核染色太深,请用1%盐酸酒精溶液将颜色分开几秒钟,然后用自来水清洗。
5.染色细胞质
将样品浸入曙红染料溶液中1分钟,然后用自来水洗涤。
6.自然干燥干细胞攀爬完薄膜后,用中性胶密封薄膜。如果细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间将相应延长。苏木精染色12-15分钟,曙红染色5分钟。
四,细胞HE染色实验所需试剂清单
序号 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
1 | PBS缓冲液 | HC2031 | ||
2 | 乙醇 | JT26000 | 64-17-5 | |
3 | 苏木精 | SX0217 | 517-28-2 | |
4 | 二甲苯 | JT24017 | 1330-20-7 | |
5 | 酚红溶液 | HC1144 |