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染色体Q显带技术实验(实验介绍,实验步骤,实验注意事项,实验所需的试剂)

Release Time:2020-07-23

一、染色体Q显带技术简介:
※ 染色体Q显带技术是使用Q带技术用荧光染料对染色体标本进行染色在荧光显微镜下,这些染色体显示出不同的暗条纹和亮条纹,主要原因是染色体DNA中富含AT的区域对奎宁酸的荧光有增强作用,它显示出一条亮带;相反,DNA中富含CG的区域对奎宁酸的荧光有弱化作用,因此显得较暗带。
※ 非同源染色上的条纹不一致,而同源染色体上的条纹相同,因此,该技术可用于识别和识别每个染色体的变异目前,常用的Q波段技术是用荧光染料对奎纳克林进行染色,因此也被称为奎纳克林的荧光Q波段Q皮带与G皮带相同,即Q皮带的亮区是G皮带的深色区域,相反,Q皮带的暗区为G型皮带的浅色区域。

二、染色体Q显带技术实验所需的材料及试剂:
氮芥喹吖因蒸馏水、磷酸盐缓冲液、柠檬缓冲液。
三、染色体Q显带技术实验步骤
1.常规染色体生产,生产要求与G带相同
2.将玻片浸入pH 6.0磷酸盐缓冲液或柠檬缓冲液中5分钟。
3.用荧光染料0.005%氮芥喹吖因或0.5%二盐酸喹吖因染色15-20分钟。
4.用流水冲洗荧光染色液。
5.分色:将荧光染色的薄膜置于pH 6.0磷酸盐缓冲液,柠檬酸缓冲液或蒸馏水中进行分色,每次5分钟,共三遍。
6.最后一次分色后,添加pH 6.0的磷酸盐缓冲液,柠檬酸缓冲液或蒸馏水,并盖上干净的盖玻片(注意不要有气泡),然后在盖玻片上使用指甲油或石蜡油密封膜周围以防止蒸发。
7.将制备的载玻片放置在荧光显微镜下观察,并通过显微照相照相所需的中期染色体图像以进行核型分析。
四、染色体Q显带实验注意事项:
1.荧光染料染色后,必须正确掌握分色时间这是Q频段是否清晰的关键如果荧光太弱,则可以小心地取下玻璃盖,并用荧光染料重新染色,然后顺序分离颜色盖膜如果荧光太强且带状图案不清晰,请取下盖玻片,然后再次将其放在缓冲液中一分钟。
2. Q传送带的胶片年龄不应太长,通常在一周内。
3.褪色后,荧光染色膜仍可用于G波段染色可以将荧光褪色在pH 6.0缓冲液中浸泡12至24小时,然后干燥以备后用。
4.使用荧光显微镜时,根据光源可分为两种通常,直接下降类型更好由于直接落下的光源来自目镜和物镜之间,并且物镜落在样本上,因此对眼睛的伤害较小,并且光源可以发挥最大的作用,因此可用于荧光显微镜检查。摄影效果更好。
5.荧光显微镜使用的光源是HBO 220W高压汞灯,可以组合使用BG12激发滤光片和510 mm栅栏滤光片以获得更好的效果。
五、染色体Q显带实验所需试剂清单:
序列 产品名 货号 CAS 备注
1 磷酸盐缓冲液 HC1918    
2 磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 HC0096    
3 蒸馏水 SS1456 7732-18-5  
在做染色体Q显带技术实验请选用高质量试剂。


 
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