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制备细菌培养用培养基和抗生素的方法（制备培养基,制备抗生素）
Release Time：2020-07-23一、制备常用的培养基方法
细菌培养用培养基和抗生素是生物实验中最常用的试剂，学会制作培养基和抗生素溶液是生物实验技能的必杀技。
1. 制备LB培养基
将以下成分溶于0.9L水中：
| 序号 | 产品 | CAS号 | 货号 | 备注 |
| 1 | 蛋白胨10g | 68308-36-1 | SS6091 | |
| 2 | 酵母提取物5g | 119-44-8 | SS6186 | |
| 3 | 氯化钠10g | 7647-14-5 | JT0001 | |
| 4 | 氢氧化钠 | 1310-73-2 | JT8650 | |
| 5 | 琼脂粉 | 9002-18-0 | SW0006 | |
| 6 | 琼脂平板 |
如有必要，用1NNaOH（?1ml）将pH调节至7.0，然后用水补足至1L。注意：将12g / L琼脂粉加到琼脂平板上，然后将7g / L琼脂粉加到上琼脂平板上。
2. 制备SOB介质
将以下成分溶于0.9L水中：
| 序号 | 产品 | CAS号 | 货号 | 备注 |
| 1 | 蛋白胨20g | 68308-36-1 | SS6091 | |
| 2 | 酵母提取物5g | 119-44-8 | SS6186 | |
| 3 | 氯化钠0.5g | 7647-14-5 | JT0001 | |
| 4 | 1mol/L氯化钾2.5ml | 7447-40-7 | JT0010 | |
| 5 | 1mol / L氯化镁 | 7786-30-3 | JT2113 |
用水补足至1L。分成100毫升等分试样，高压灭菌。将介质冷却至室温后，向每100ml等分试样中加入1ml灭菌的1mol / L氯化镁。
3. 制备SOC培养基
成分和方法与SOB培养基的制备方法相同，不同之处在于将培养基冷却至室温后，除了向每100ml等分试样中添加1ml灭菌的1mol / L氯化镁外，还添加2ml灭菌的1mol / L葡萄糖（溶解在足够的水中加入18g葡萄糖，然后加水至100ml，过滤并用0.22um过滤器灭菌）。
| 序号 | 产品 | CAS号 | 货号 | 备注 |
| 1 | 1mol/L氯化镁 | 7786-30-3 | JT2113 | |
| 2 | 1mol/L葡萄糖 | 50-99-7 | SC0001 |
4.制备TB培养基，将以下成分溶于0.9L水中：
| 序号 | 产品 | CAS号 | 货号 | 备注 |
| 1 | 蛋白胨12g | 68308-36-1 | SS6091 | |
| 2 | 酵母提取物24g | 119-44-8 | SS6186 | |
| 3 | 甘油4ml | 56-81-5 | JT26018 | |
| 4 | 磷酸二氢钾 | 7778-77-0 | SS1343 | |
| 5 | 磷酸氢二钾 | 7758-11-4 | LSH76412 |
溶解组分并高压灭菌。冷却至60°C，然后添加100ml灭菌的170mmol / LKH2PO4 / 0.72mol / LK2HPO4溶液（将2.31g KH2PO4和12.54gK2HPO4溶解在足够的水中以使最终体积为100ml。高压灭菌或使用0.22um灭菌膜过滤）。
5. 制备2×YT培养基
将以下成分溶于0.9L水中：
| 序号 | 产品 | CAS号 | 货号 | 备注 |
| 1 | 蛋白胨16g | 68308-36-1 | SS6091 | |
| 2 | 酵母提取物10g | 119-44-8 | SS6186 | |
| 3 | 氯化钠4ml | 7647-14-5 | JT0001 | |
| 4 | 氢氧化钠 | 7647-14-5 | JT0001 | |
| 5 | 琼脂粉 | 9002-18-0 | SW0006 |
如有必要，用1NNaOH（?1ml）将pH调节至7.0，然后用水补足至1L。注意：将12g / L琼脂粉加到琼脂平板上，然后将7g / L琼脂粉加到上琼脂平板上。
6. 制备YPD培养基
将以下成分溶于0.9L水中：
| 序号 | 产品 | CAS号 | 货号 | 备注 |
| 1 | 蛋白胨20g | 68308-36-1 | SS6091 | |
| 2 | 酵母提取物10g | 119-44-8 | SS6186 | |
| 3 | 葡萄糖20g | 50-99-7 | SC0001 | |
| 4 | 色氨酸 | 73-22-3 | CCF11426 | |
| 5 | 琼脂粉 | 9002-18-0 | SW0006 |
用水和高压釜将体积补足至1L。建议在高压灭菌之前每升色氨酸营养缺陷型培养基添加1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了准备板，高压灭菌前需要添加20克琼脂粉。
二、制备常用抗生素的方法
| 序号 | 产品 | CAS号 | 货号 | 备注 |
| 1 | 氨苄青霉素 | 7177-48-2 | SS0353 | |
| 2 | 氨苄青霉素钠 | 69-52-3 | SS0354 | |
| 3 | 羧苄青霉素钠 | 4800-94-6 | SS0406 | |
| 4 | 甲氧西林钠 | 132-92-3 | YZM000023 | |
| 5 | 硫酸卡那霉素 | 25389-94-0 | SS0387 | |
| 6 | 氯霉素 | 56-75-7 | SS0356 | |
| 7 | 无水乙醇 | 64-17-5 | JT26000 | |
| 8 | 硫酸链霉素 | 3810-74-0 | SS0394 | |
| 9 | 萘啶酸 | 389-08-2 | FMK22639 | |
| 10 | 盐酸四环素 | 64-75-5 | SS0374 | |
| 11 | 硫酸卡那霉素 | 25389-94-0 | SS0387 |
1、氨苄西林（100mg / ml）
将1g氨苄西林钠盐溶于足够的水中，最后使体积达到10ml。分小部分储存在-20°C下。它通常以25ug / ml?50ug / ml的终浓度添加到生长培养基中。
2、羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg / ml）
将0.5g羧苄青霉素二钠盐溶于足够的水中，最后使体积达到10ml。分小部分储存在-20°C下。它通常以25ug / ml?50ug / ml的终浓度添加到生长培养基中。
3、甲氧西林（甲氧西林）（100mg / ml）
将1g甲氧西林钠溶于足够的水中，最后使体积达到10ml。分小部分储存在-20°C下。通常将其以37.5ug / ml和100ug / ml氨苄西林的终浓度添加到生长培养基中。
4、卡那霉素（10mg / ml）
将0.1g卡那霉素溶于足够的水中，最后稀释至10ml。分小部分储存在-20°C下。通常以10ug / ml?50ug / ml的终浓度加入生长培养基。
5、氯霉素（25mg / ml）
将0.25g氯霉素溶于足量的无水乙醇中，最后稀释至10ml。分小部分储存在-20°C下。通常以最终浓度12.5ug / ml?25ug / ml加入生长培养基。
6、链霉素（50mg / ml）
将0.5g链霉素硫酸盐溶于足够量的无水乙醇中，最后稀释至10ml。分小部分储存在-20°C下。通常以10ug / ml?50ug / ml的终浓度加入生长培养基。
7、萘啶酸（5mg / ml）
将0.05g萘啶酮钠盐溶解在足够的水中，最后稀释至10ml。分小部分储存在-20°C下。它通常以15ug / ml的最终浓度添加到生长培养基中。
8、替卡西林（10mg / ml）
将0.1g盐酸四环素溶于足够的水中，或将无碱四环素溶于无水乙醇中，并稀释至10ml。分成小等分试样，并用铝箔包裹液体管，以防止溶液暴露在光线下。储存在-20℃。通常以10ug / ml?50ug / ml的终浓度加入生长培养基。
9、要制备10mg / ml卡那霉素。
请先向盐水瓶或血清瓶中添加10ml双蒸馏水，在高压冷却后添加0.1g卡那霉素，充分混合，将其过滤到试管中，然后将1ml /管分开放入EP管中以备后用。
