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分离人外周血白细胞（实验介绍,实验原理,实验所需材料,实验步骤,实验所需试剂）
Release Time：2020-07-22一、从正常人外周血中分离白细胞的实验原理
高分子量聚合物可以促进红细胞聚集成一堆，进而可以加速红细胞的沉降，并使红细胞与白细胞分离开，常用的红细胞分离高分子聚合物是明胶，聚乙烯吡咯烷酮，葡聚糖甲基纤维素。
二、分离人外周血白细胞实验所需的材料
明胶;葡聚糖;汉克斯平衡盐溶液；聚乙烯吡咯烷酮;甲基纤维素等
三、分离正常人外周血白细胞的实验步骤
1.加速红细胞沉降实验法
1）抽取抗凝静脉血，并加入等量的3％明胶盐水或6％葡聚糖溶液，并充分混合。
2）将试管在室温或37℃的培养箱中直立放置30-60分钟，并利用明胶与红细胞的结合作用促进红细胞快速下沉，而白细胞则保留在明胶溶液中。
3）用毛细管吸管吸取富含白细胞的上清液，然后将其转移到另一个试管中。
4）将钙和镁离子+汉克斯平衡盐溶液添加到距试管口3cm的位置，混合均匀，在水平离心机中以2000r / min的速度离心10min，弃去上清液，并用相同的方法洗涤两次。
5）将沉淀的细胞重悬于含10％-20％灭活的小牛血清的汉克斯平衡盐溶液中，计数，并制备成所需细胞浓度的悬浮液，通常为2×106 / min。
2.自然沉降实验方法
1）取2ml静脉血，将其放入带有抗凝剂的试管中，并轻轻混合。
2）将试管在室温或37℃的培养箱中直立放置30-60分钟，然后等待红细胞自然沉降。此时，可以看到试管中的悬浮液分为三层，上层是浅黄色血浆，下层是红血球，并且有灰白色白细胞层（正常人外周血白细胞）上的红细胞层。
3）用毛细管吸起红细胞层上富含白细胞的细胞悬液，并将其转移至另一试管中；
4）将钙和镁离子+汉克斯平衡盐溶液添加到距试管口3cm的位置，混合均匀，在水平离心机中以2000r / min的速度离心10分钟，弃去上清液，并用相同的方法洗涤两次。
5）将沉淀的细胞重悬于含10％-20％灭活的小牛血清的汉克斯平衡盐溶液中，计数，并制备成所需细胞浓度的悬浮液，通常为2×106 / min。
四、分离人外周血白细胞的实验所需试剂清单
| 序号 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | Hanks平衡盐溶液 | HC1153 | ||
| 2 | 葡聚糖（右旋糖酐） | SS1907 | 9004-54-0 | |
| 3 | 明胶 | SW0001 | 9000-70-8 | |
| 4 | 聚乙烯吡咯烷酮 | CG0276 | 9003-39-8 | |
| 5 | 甲基纤维素 | SS1838 | 9004-67-5 |
