色谱柱的选择(实验简介,实验步骤,注意事项,所需试剂)
Release Time:2020-08-06一、色谱柱的选择简介:
色谱柱的选择通常根据相似相容的原理进行色谱柱的选择,例如极性色谱柱对应极性物质,而色谱柱的规格如内径,柱长与固定液膜厚等参数,决定了这根色谱柱的分析能力。
二、色谱柱的选择实验步骤
(一).使用氨基柱时:
应该注意的是,氨基色谱柱的键合官能团氨基丙基比C18和C8色谱柱的键合官能团C18和C8更容易水解,因此,首先必须准备好其使用寿命短,尤其是当使用条件在相反的条件下。在反相条件下使用时,此时影响最大的因素是PH值的范围,因此必须做好PH值范围的控制,PH值与水解成反比,当PH值越低时,水解的风险也就越。因此,在使用后以及准备长时间保存时,必须将氨基柱清洗并保存在纯净的水中。有机溶剂是良好的维护措施。
有一种情况是,当使用氨基色谱柱分析酸性物质(例如果汁中糖分)时,酸性物质的存在意味着质子的存在,质子可能会使带有轻微负电荷的氨基官能团质子化,从而导致使用一段时间后,某些类型的分析物的保留特性发生了变化,或者柱效降低了。这时建议用5-10倍于含有0.5-1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液的色谱柱体积洗涤色谱柱,同时在后续再分析此类酸性分析物时在流动相中添加少量氨水,例如0.1%。
3.使用氰基柱时:
正相色谱柱通常用于正相色谱,但也可以用于反相色谱(即,正相色谱柱使用反相条件)。当将其用于正相色谱法时,可以使用低极性流动相,例如正己烷,而当用于反相色谱法时,作用于甲醇或水的强极性流动相,因为疏水性相对较低,并且由于具有腈基,因此与ODS(反相)相比具有不同的选择性。当用作反相时,适用于分离在ODS上分离时间过长的组分。
(三).使用苯基柱时:
它属于正相色谱法和反相色谱法。它主要用于含苯基物质,属于一种特殊的色谱柱。当用于正相色谱时,可以使用低极性流动相,例如正己烷,请参阅相应的硅胶柱。当用于反相色谱时,可以使用强极性的甲醇或水的极性流动相,请参阅相应的C18柱。洗涤方法与氰基柱相同。
三、色谱柱的选择实验注意事项:
氨基柱、氰基柱和苯基柱的清洗:在正相条件下使用的氨基柱应参考硅胶柱的清洗方法,在反相条件下应参考C18清洗方法。
四、色谱柱的选择实验所需试剂清单:
序列 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
1 | NH3 | JT8652 | 1336-21-6 | |
2 | 乙腈 | JY0313 | 75-05-8 | |
3 | 甲醇 | JT25999 | 67-56-1 | |
4 | 无菌去离子水 | HC1314 |