ER-Tracker Green

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ER-Tracker Green（BODIPY FL 格列本脲）使用方法
本实验方案经牛肺动脉内皮细胞优化，且已被其他常规细胞系验证。但不同的细胞类型其最佳使用条件不同，还需用户根据该方案进行进一步优化。
1. 准备试剂
使用前将ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide)回温至室温，并简短离心使该DMSO溶液至管底。
2.  细胞样品处理及染色
2.1 将1mM ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide)储存液按照实验要求稀释至工作浓度，推荐工作浓度为～1µM。建议在不影响实验结果的前提下尽量使用较低浓度探针，以避免由于浓度过高染色导致的假象。
注：使用含Ca2+、Mg2+ Hank’s 平衡盐溶液（HBSS/Ca/Mg）稀释该探针进行染色，可得到最佳实验结果。
2.2 染色过程
对于贴壁细胞，吸除培养皿中培养基，用HBSS清洗细胞，加入预热的染料工作液于37℃孵育细胞15-30min。吸除染色液，加入不含探针的新鲜培养液，并在荧光显微镜下观察细胞。
细胞如需固定，请参考以下步骤。
3．细胞固定
3.1 固定细胞：用4%甲醛于37℃固定细胞2min。
注：已染色细胞用醛固定后，仅部分ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide)留在细胞内，荧光信号会有部分衰减。
3.2 清洗观察细胞：细胞固定后，可用合适缓冲液进行清洗，每次5min，共2次。清洗后可对细胞进行后续封片、镜检或进一步染色。
注：不建议对细胞进行透化处理，因为经Triton X-100透化后，无信号保留。

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名称	ER-Tracker Blue-white 蓝色	ER-Tracker Green 绿色	ER-Tracker Red 红色
货号
Ex/Em	374/430-640nm	504/511nm	587/615nm
滤片推荐	DAPI OR UV Long pass	FITC	TRITC
分子量	580.5283	783.0952	915.2316
分子式	C26H21F5N4O4S	C37H42BClF2N6O6S	C44H42BClF2N6O7S2
活细胞	Yes	Yes	Yes
固定细胞	No	No	No
探针标记后可固定	Yes	Yes	Yes
检测平台	成像	成像	成像

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用 ER-Tracker Green 和 MitoTracker Red CMXRos 标记的活牛肺动脉内皮细胞。

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使用 ER-Tracker™ Green (BODIPY® FL Glibenclamide)（绿色）对活 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。 蓝色伪彩 = DRAQ5（荧光 DNA 染料）。

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实验注意事项：
1. 避光保存，避免反复冻融，可根据单次用量分装保存。避免将本品储存于无霜冰箱；
2. ER-Tracker Green (1mM)在4℃条件下、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，使用前可以20-25℃水浴片1-5分钟至全融解后使用。对于微量的液体，使用前需要离心数秒钟后，使液体充分沉降到管底；
3. 本产品仅供科学研究使用！

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