CellTracker Blue CMAC Dye

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CellTracker™ Blue CMAC 详细介绍：
CellTracker™ Blue CMAC 荧光染料可自由穿过细胞膜进入细胞，并在细胞内转化为不透细胞膜的反应产物。 CellTracker™ Blue CMAC 染料在活细胞中保留了几代。 染料被转移到子细胞，而不是群体中的相邻细胞。 CellTracker™ Blue CMAC 染料设计为显示至少 72 小时的荧光，该染料具有理想的示踪特性：在工作浓度下稳定、无毒、在细胞中保留良好，在生理 pH 值下发出明亮的荧光。 此外，CellTracker™ Blue CMAC 染料的激发和发射光谱与 GFP（绿色荧光蛋白）和 RFP（红色荧光蛋白）光谱完全分离，可进行多路复用。

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CellTracker™ 蓝色 CMAC（7-氨基-4-氯甲基香豆素）是一种非常适合监测细胞运动或位置的荧光染料。此染料保留良好，因此可对细胞运动进行多代追踪。蓝色激发/发射光谱适用于使用绿色和红色荧光染料和蛋白的多通路技术。
•易于使用—去除培养基，添加染料，孵育30分钟，进行细胞成像
• 荧光信号保留 >72 小时（通常3至6代）
• 适用于多通路技术的蓝色激发/发射光谱（最大值为 353/466 nm）
• 低细胞毒性—不影响活力或增殖

CellTracker™ 蓝色 CMAC 荧光染料设计用于自由穿过细胞膜进入细胞，在其中转化为细胞膜不可透过性反应产物。CellTracker™ 蓝色 CMAC 染料可在活细胞中保留多代。该染料可转移到子细胞中，但不会转移到群体中的相邻细胞中。CellTracker™ 蓝色 CMAC 染料设计用于显示荧光至少72小时，且染料表现出理想的追踪特性：在工作浓度下保持稳定且无毒性，可稳定保留在细胞中，且在生理 pH 值下可发出明亮的荧光。此外，CellTracker™ 蓝色 CMAC 染料的激发和发射光谱与 GFP（绿色荧光蛋白）和 RFP（红色荧光蛋白）光谱分离良好，可用于多通路技术。

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CellTracker Blue CMAC Dye 染料特点：
※  荧光信号保留时间>72 小时（通常为三到六代）
※  蓝色激发/发射光谱（353/466 nm 最大值）是多路复用的理想选择
※  低细胞毒性——不影响活力或增殖

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CellTracker 蓝色、绿色和红色染料进行多色图像分析

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实验步骤：
1. 使用无水 DMSO 将 CMAC 固体溶解，配制成 10 mM 的储存液。使用无血清的培养基将储存液稀释至 0.5~25 μM 的工作液。在使用之前将工作液置于 37℃进行预热。
2. 根据不同的细胞类型在不同的细胞培养条件下孵育 15~45 分钟。对于悬浮细胞，离心弃上清，收集细胞沉淀。用预热的染色液重悬细胞；对于贴壁细胞，当细胞生长到合适的细胞密度，移除上清培养液，加入预热的染色液。
3. 移除染色液，加入新鲜预热的细胞培养基，37℃孵育 30 分钟。
4. 对于悬浮细胞，吸取 5 μl 左右染色后的细胞滴至载玻片上，加盖盖玻片，置于荧光显微镜下观察；对于贴壁细胞，直接观察即可。（可选）如需固定细胞，可先跳过步骤 4，待固定步骤完成后再做观察准备。
5. 使用 PBS 清洗细胞。
6. 使用含有 3.7%多聚甲醛的 PBS 固定细胞，室温孵育 15 分钟。
7. 使用 PBS 清洗细胞。
8. 如果需要可对细胞膜进行透化处理。当细胞需要进行抗体标记时，细胞膜的透化处理是有必要的，便
于促进抗原进入细胞。可以使用冰冷丙酮处理细胞 10 分钟，可以提供细胞的渗透性。
实验说明：
※ 根据不同的实验需求选择合适的染色液浓度，建议在正式实验之前做了一个倍比稀释的**浓度测试。
※ 通常情况下，长时间染色（超过 3 天）使用染色液浓度为 5~25 µM, 短时间染色使用低浓度的染色液浓度 0.5~5 µM，比如细胞活性分析实验。
※ 为了维持正常的细胞生理形态，避免给细胞带来不必要的损伤，在达到染色效果的目的的情况下，尽可能地使用低浓度的染色液。

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