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一、chelex 100介绍
Chelex100螯合树脂产物是含有一对亚氨基二乙酸离子的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物的有机化学产物（chelex 100螯合树脂在结合多价金属离子的过程中用作螯合基团）。由于Chelex 100树脂的羧酸基团，chelex 100通常被分类为弱阳离子交换树脂。但是，该产品与这种类型的交换树脂之间的区别在于Chelex 100具有非常高的金属离子比选择性。 Chelex100具有非常高的键合强度，还用于生命科学中以提取DNA。

产品名	Chelex100螯合树脂
货号	SS6072
规格	1g,5g,25g,100g,1kg

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二、chelex 100提取DNA方法
※ 加入1/50体积的蛋白酶K（10 mg / mL），并将样品在65°C孵育2小时至过夜。
※ 200 uL 5％Chexlex-100，加入10 uL蛋白酶K（20 mg / mL），在37°C下孵育2小时。
※ 50ul Chelex液及lfl蛋白酶K水，56％温水浴消化2h后，煮沸8min，迅速放人冰盒冷却4min，以5000r ／ min速度离心lmin。吸取上清液作为DNA扩增模板于20 ％保存备用。
※ 所有细菌菌株均在400μl的5％Chelex 100缓冲液（包含0.03％SDS，1％Tween-20和1％NP40）中处理并煮沸15分钟。通过除去一些上清液来扩增每个样品的DNA。为了裂解葡萄球菌，将蛋白酶K加入到5％Chelex 100缓冲液中，并将混合物在56℃下保温60分钟，然后煮沸15分钟。将存在肝素的血样在五倍体积的0.87％NH4Cl中进行红细胞裂解，沉淀白细胞，悬浮于200μl含20 mg / ml蛋白酶K的5％Chelex 100缓冲液中，于200℃温育。 56℃下60分钟，然后煮沸15分钟，离心1分钟，此时收集上清液用于PCR扩增。将CSF样品离心5分钟。然后除去上清液，并将细胞沉淀重悬于混合物中，并以与血样相同的方法处理。

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三、chelex 100的应用
采用chelex100从头发以及其他样本中提取DNA（法医鉴定应用）
※ chelex100提取DNA实验首先取一小块冷冻的组织（少于1mg，可以用消毒的移液器尖端钻出），或1-3根有根的头发（需要依次用90％，70％乙醇和消毒水洗涤，并切断发干），或1 -5µl血液，加高温灭菌离心管将500 µl 5％的Chelex溶液加入离心管中。
※ 将样品管在56°C下放置1小时或更长时间，直到组织样品变成粉状（不同的组织需要不同的时间）。
※ 在振荡器上振荡10-15秒。
※ 在95-100℃下煮15?40分钟。
※ 在振荡器上振荡10-15秒。
※ 在PCR反应之前将样品管保存在4°C并再次离心以沉淀Chelex颗粒。取上清液（1-10µl）作为DNA模板。

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四、Chelex 100DNA提取方法设计：
※ 8-10 ascos，加入7-10粒石英砂，在液氮中冷冻5-10分钟，取出并在冰上研磨
※ 加入200 ul 5％的Chelex并振摇10s。
※ 在37℃下温水浴过夜。
※ 振动10秒钟。
※ 99.9℃PCR 12分钟，以10000 rpm的速度离心10分钟。
※ 取5ul上清液作为模板DNA进行PCR扩增。
※ 1.5％再生胶，150V持续10分钟。
※ 使用Biotech恢复套件进行恢复。

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五、chelex 100产品
※ 分子生物级chelex 100螯合树脂
※ 去金属阳离子用chelex 100螯合树脂

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六、Chelex100提取DNA的原理：
Chelex100是一种化学类的螯合树脂，由苯乙烯和二乙烯基苯的共聚物组成。Chelex100可以螯合多价金属离子，尤其是二价离子（例如镁离子），这会降解系统中的DNA。核酸酶被灭活，从而保护了DNA分子。 Chelex-100方法用于在同一试管中提取DNA，因此样品的丢失率低，污染相对困难，操作简单快捷，价格低廉，对试剂设备的要求低，被广泛用于常规物理的DNA提取实验过程中。
Chelex100提取DNA案例说明：使用少量的Chelex-100方法从少量口腔脱落细胞中提取DNA用于STR分型，分型9个以上STR位点的成功率约为60％，使用了Chelex-100法提取DNA。56.25％的成功率，然而，该方法将DNA样品的载体，核膜和其他试剂保留在同一离心管中，不能有效去除杂质，降低DNA的纯度，并可能抑制下游PCR扩增，导致检测率降低。常晶晶等。使用6种不同的方法从全血中提取DNA，实验证明，常规Chelex-100方法获得的DNA模板纯度低。因此，Chelex-100方法通常仅适用于光污染，低杂质，高DNA含量和小载体体积的常规样品的DNA提取。但是，在污染，腐败和痕量样品的处理上存在很大的局限性。例如，当作者使用此方法处理工具手柄和绳索服装检查材料时，检出率分别较低，分别为33.33％和13.33％，明显低于QIAcube纯化方法的72.22％和80.00％。

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七、Chelex 100提取DNA的详细实验步骤：

 图4.1Chelex 100提取操作快速简便。
※ 将细胞材料加入1ml TE（1mM EDTA，10mM Tris：pH 8.0）中，并在室温下孵育10-15分钟。
※  将管高速离心以沉淀细胞材料并除去上清液。
※  将细胞物质沉淀重悬在5％Chelex 100中，将试管在56°C下孵育15-30分钟，然后放在沸水浴中放置8分钟。将试管高速离心2-3分钟以沉淀沉淀的蛋白质。
※  上清液含有DNA，可直接用于PCR含成对的亚氨基二乙酸根离子的共聚物。该树脂对多价金属离子（例如镁（Mg2 +））具有很高的亲和力；它螯合了多价金属离子，并有效地将其从溶液中去除。
Chelex 100提取DNA过程非常简单，使用小珠形式提供的Chelex'®100树脂使用蒸馏水制成5％的悬浮液。将细胞材料与100悬浮液在56°C孵育30分钟。此时，通常会添加消化大多数细胞蛋白质的蛋白酶K。在100°C下温育8-10分钟，以确保所有细胞都破裂并且蛋白质变性。然后将试管简单地离心以将Chelex 100树脂和变性的蛋白质沉淀在试管的底部，剩下含有要用于PCR的DNA的水溶液（图4.1）。 Chelex 100悬浮液是碱性的，pH值介于9.0和11.0之间，因此使用此程序分离的DNA是单链的。
chelex 100方法提取DNA的主要优点是：快速，耗时约1小时；它很简单，不涉及液体在试管之间的移动，从而减少了意外混合样品的可能性。成本很低；并且避免使用有害化学物质。重要的是，它适用于各种法医样品