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对染色体G显带技术介绍
Release Time：2020-07-21一、染色体G显带技术简介：
染色体G显带技术中条带模式的形成主要是由于DNA，核酸结合蛋白和染料的相互作用，它主要指DNA的序列，染色体上螺旋形和折叠非组蛋白的分布存在区域差异，这些差异导致二硫键和硫氢键的分布不同，深色区域通过许多二硫键交联，因为它很容易与染料结合，浅色区域缺少二硫键和多硫氢键，难以与染料结合，呈现浅色。另外，由于DNA在染色体中的碱基分布不同，DNA的螺旋和折叠程度也不同，进而影响结合蛋白的分布和构型，与染料结合后，表明不同级别的子线，该方法是GTG方法（G波段，Trysin使用的Giemsa）
二、染色体G显带技术所需材料及试剂：
Hank's溶液、ICN溶液、0.02％EDTA溶液、磷酸盐缓冲液、Giemsa储备溶液、胰酶溶液。
三、染色体G显带技术步骤
1.将准备好的染色体玻片在65°C的烤箱中烘烤2至3小时，然后放入37°C的培养箱中以备后用。
2.用生理盐水配制0.14％的磷酸蛋白酶溶液（70 毫克磷酸酶减少50 毫升生理盐水），并储存在-18°C下以备后用。使用时，取15 毫升母液和35 毫升 pH 6.7的磷酸盐缓冲液代替0.042％作为工作溶液。使用前预热至26°C。
3.将一块样品浸入胰酶溶液中15-25秒。
4.取出玻片，并用蒸馏水冲洗以除去胰酶溶液。
5. pH 6.7磷酸盐缓冲液稀释Giemsa储备溶液（1:10）作为染料溶液，并染色8分钟。
6.用蒸馏水洗涤染料溶液，干燥并在显微镜下分析。
四、染色体G显带实验的注意事项：
1.染色体标本的G条带需要大约3天的片龄，染色体长度适中（1号染色体长度约为10±2μm），分散性好，几乎没有重叠。如果漆膜寿命延长，则蛋白酶处理时间应适当延长。
2.应准备血浆酶工作溶液以供当前使用。通过增加被处理标本的数量，酶活性将降低，并且处理时间需要延长。
3.为了获得具有适当形态的染色体标本，秋水仙素的处理浓度应较低或处理时间应较短。
4.捆扎时，可以先将一块作为测试件，然后将测试件分开进行不同的酶解时间，以分解适当的酶解时间。
5.酶解时间与酶液温度和胰酶浓度成反比。较高的温度或较高的浓度意味着较短的处理时间。
6.褪色后可使用Q条纹样品进行G条纹，方法与以前相同。
7.当G显带不足时，可以在固定剂褪色后再次束带，但效果不佳。
8.胰酶溶液也可以用作不含Ca2 +，毫克2 + Hank's溶液，ICN溶液或0.02％EDTA溶液的溶剂。在EDTA中微量酶的活性溶液中，应适当减少样品的酶解时间。
五、染色体G显带技术实验所需试剂清单：
| 序列 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | Hanks平衡盐溶液(含酚红) | HC1153 | ||
| 2 | EDTA | BSH83093 | 162303-59-5 | |
| 3 | 磷酸盐缓冲液 | HC1488 | ||
| 4 | 胰酶 | SS2237 | 8049-47-6 | |
| 5 | 吉氏色素 | SX0115 | 51811-82-6 |
