还原糖和总糖的测定(3,5-二硝基水杨酸比色实验)
Release Time:2020-07-09一,还原糖和总糖的测定简单介绍:
还原糖和总糖的测定原理主要是利用糖的不同溶解度,可以分别提取植物样品中的单糖,二糖和多糖,并通过酸水解将未还原的二糖和多糖降解为还原的一糖,掌握确定还原糖和总糖的基本原理,并学习如何通过比色法和分光光度计测量还原糖。
二,还原糖和总糖的测定比色原理:
还原糖的测量是定量测定糖的基本方法:还原糖是指含有游离醛或酮基的糖,单糖是还原糖,二糖和多糖不一定是还原糖,其中乳糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用糖的不同溶解度,可以分别提取植物样品中的单糖,二糖和多糖,并通过酸水解将未还原的二糖和多糖降解为还原的一糖。然后确定样品中还原糖和总糖的含量(就葡萄糖含量而言,为还原糖)。
在碱性条件下降低糖含量加热它被氧化成糖酸和其他产物,而3,5-二硝基水杨酸被还原成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕色和红色物质的颜色深度成比例。使用分光光度计测量540 nm波长的光密度。检查标准曲线并计算。总糖含量。由于多糖被水解成单糖,因此分子水会加入每个断裂的糖苷键中,因此在计算多糖含量时,应乘以0.9。
三、还原糖和总糖的测定实验材料,主要仪器和试剂:
序号 | 名称 | 货号 | CAS | 备注 |
1 | 蔗糖 | SS1498 | 57-50-1 | |
2 | 水杨酸 | SY0007 | 69-72-7 |
面粉;精密pH试卷.
2.主要仪器
(1)带塞玻璃秤试管:20毫升×11
(2)大型离心管:50mL×2
(3)烧杯:100毫升×1
(4)三角瓶:100ml×1
(5)容量瓶:100mL×3
(6)刻度移液器:1mL×1; 2mL×2; 10毫升×1
(7)恒温水浴
(8)开水浴
(9)离心机
(10)扭矩平衡
(11)分光光度计。