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高效液相色谱法
Release Time：2020-05-27 高效液相色谱法是药物定量和定性分析中最常用的方法之一，但是在药物中进行HPLC分析的前10个技巧中却缺少一些技巧，事实证明它过于复杂。这些提示除了推动错误的分析元素（例如温度）外，还有助于优化分析过程。这些技巧包括了解HPLC分析的含义。在这种情况下，需要优化选择性。
1.技巧一是避免尝试重新发明轮子，这将导致大量实验，从而浪费时间。取而代之的是，应该先参考现有文献，然后再确定合适的条件。此类文献通常还包含有关最适合的HPLC分析，正相HPLC或反相HPLC的信息。
2.另一个提示是确定所需的样品制备方法。样品制备取决于溶解，预浓缩或过滤等，具体取决于优化特定样品选择性的制备。
3.正确选择色谱方法对于获得可靠的分析结果很重要。酸性和碱性分析物应使用反相离子抑制器进行分析。对于中低极性，最合适的色谱类型是正相HPLC。另一方面，离子交换色谱最适合无机阴离子和阳离子。
4.复杂的样品应使用梯度HPLC处理。在这种情况下，这是最合适的方法，因为它在复杂样品中提供了更高的分辨率和更高的峰数。同样，梯度HPLC消除了在等度条件下容量范围因子超出范围的缺点。
5.列的大小应正确。除非是复杂样品。色谱柱的尺寸应为10-15厘米，以填充3或5微米的填料。
6.在选择检测器时，应考虑样品特性。这些性质包括发色团的存在，可进行紫外线检测。检测限也应考虑在内。另一个考虑因素是必须进行化学衍生以提高灵敏度。
7.荧光和紫外线波长是优化工艺的重要参数。紫外线波长应设置为最大，而导致最大发射的荧光波长应参考现有文献，或通过使用专家系统软件和经验方法来推导。
8.清洁度在色谱过程中至关重要。因此，应始终通过使用色谱柱保护装置，过滤器样品，过滤器缓冲的流动相，样品净化和适当冲洗来保持色谱柱清洁。
9.高峰问题是常见的现象，可能有多种原因。秘密在于确定峰值问题的原因并加以解决，例如，流路中断或床层装填不足可能会导致残留量增加的拖尾现象。
10.选择最合适的高效液相色谱方法后，应遵循后续验证过程以确保该过程的可靠性。此过程还应包括仔细检查必要的程序和准备工作，通过这些程序和准备工作，观察结果将获得高度可靠的HPLC分析。
1.技巧一是避免尝试重新发明轮子，这将导致大量实验，从而浪费时间。取而代之的是，应该先参考现有文献，然后再确定合适的条件。此类文献通常还包含有关最适合的HPLC分析，正相HPLC或反相HPLC的信息。
2.另一个提示是确定所需的样品制备方法。样品制备取决于溶解，预浓缩或过滤等，具体取决于优化特定样品选择性的制备。
3.正确选择色谱方法对于获得可靠的分析结果很重要。酸性和碱性分析物应使用反相离子抑制器进行分析。对于中低极性，最合适的色谱类型是正相HPLC。另一方面，离子交换色谱最适合无机阴离子和阳离子。
4.复杂的样品应使用梯度HPLC处理。在这种情况下，这是最合适的方法，因为它在复杂样品中提供了更高的分辨率和更高的峰数。同样，梯度HPLC消除了在等度条件下容量范围因子超出范围的缺点。
5.列的大小应正确。除非是复杂样品。色谱柱的尺寸应为10-15厘米，以填充3或5微米的填料。
6.在选择检测器时，应考虑样品特性。这些性质包括发色团的存在，可进行紫外线检测。检测限也应考虑在内。另一个考虑因素是必须进行化学衍生以提高灵敏度。
7.荧光和紫外线波长是优化工艺的重要参数。紫外线波长应设置为最大，而导致最大发射的荧光波长应参考现有文献，或通过使用专家系统软件和经验方法来推导。
8.清洁度在色谱过程中至关重要。因此，应始终通过使用色谱柱保护装置，过滤器样品，过滤器缓冲的流动相，样品净化和适当冲洗来保持色谱柱清洁。
9.高峰问题是常见的现象，可能有多种原因。秘密在于确定峰值问题的原因并加以解决，例如，流路中断或床层装填不足可能会导致残留量增加的拖尾现象。
10.选择最合适的高效液相色谱方法后，应遵循后续验证过程以确保该过程的可靠性。此过程还应包括仔细检查必要的程序和准备工作，通过这些程序和准备工作，观察结果将获得高度可靠的HPLC分析。
