牛血清白蛋白(BSA)常见问题
Release Time:2022-10-19牛血清白蛋白(BSA)问题简介:
※ 牛血清白蛋白(BSA)是一种约66.5kDa的球形血清蛋白。由于其高稳定性和对许多生物反应无干扰,BSA被广泛应用于诊断测试系统中。典型应用包括用作蛋白质校准器、稳定剂或阻断剂。
※ 牛血清白蛋白(BSA)常见问题:牛血清白蛋白(BSA)在实验室中是通用的,可用于蛋白质印迹、细胞组织培养、PCR等,但BSA的多功能性使研究人员提出了许多常见问题。6个关于BSA的常见问题,并提供了BSA非常详细的答案可作为大家参考。
1. 实验应该使用什么类型的BSA?
在之前关于这个主题的文章中,实际上有更详细地讨论实验应该使用什么类型的 BSA 这个问题。这个问题经常出现,因为有许多类型的BSA可用于广泛的实验室应用,每种 BSA 都具有更好地优化实验室技术的特性。例如:如果需要阻断剂,您可能需要无IgG的BSA。
决定使用哪种 BSA 将基于您正在进行的类型实验和您的具体需求。在看了上面提到的文章及其选择指南表之后,还是可以参考其他来源,如ResearchGate,以获得更多信息和更为定制的答案。
2. BSA如何起到阻断剂的作用?
※ 阻断剂:旨在防止抗体的非特异性结合。一般来说,只要蛋白质对探针没有亲和力,理论上它就可以用作封闭剂。但如果你随机选择 BSA,可能会造成实验很可能效率低下。因此,有一些特定的 BSA 是针对这类实验。这些蛋白质与膜的结合更加一致,提高了分析灵敏度,减少了背景干扰。
※ 为什么选择BSA?首先,你不是随便要一些 BSA 就可以的。许多类型的 BSA含有IgG(当然可以有其他应用),这可能导致非特异性结合。我们的目标是选取一种BSA,对于阻断剂,尤其是BSA,您需要考虑不含免疫球蛋白的类型。
3. 我应该用BSA还是 脱脂奶粉 作为阻断剂?
BSA(牛血清白蛋白)和脱脂奶粉是两种最常用的阻断缓冲液,在防止抗体与组织的非特异性结合方面很重要。
※ 实验室中最常用的两种阻断剂:是脱脂奶粉 和 BSA。每种方法都有利弊。与BSA相比,脱脂奶粉 通常更便宜,更容易从 脱脂奶粉 中提取制备;然而,脱脂奶粉 不适合用于抗生物素-生物素系统中使用,因为 脱脂奶粉 中含有生物素,牛奶不应用于磷酸化蛋白质。
※ 通常,当使用磷酸化蛋白时,BSA 作为阻断剂的效果更好。这是因为脱脂奶粉中含有多种蛋白质,其中一种是磷酸蛋白酪蛋白,这导致了背景干扰更高。使用磷酸化蛋白时,最好的经验:选取BSA。
4. 为什么蛋白质浓度计算中需要BSA?
为了估算未知样本的蛋白质浓度,您需要将其与您的样本最相似的蛋白进行参考比较。然而,这并不总是容易找到的,所以 BSA 起到了参考作用。有几个因素促使选择 BSA 成为参考:非常丰富,价格非常低廉,非常稳定,不会对生化反应产生巨大影响。
5. 牛血清白蛋白(BSA)和胎牛血清(FBS)是同一回事吗?
血清白蛋白(BSA)和胎牛血清(FBS)这两个产品品完全不一样。胎牛血清:是真核细胞培养中常用的血清补充剂。FBS对细胞培养的好处是其抗体水平较低,生长因子水平较高。牛血清白蛋白(BSA):用于多种实验室应用,包括其作为:蛋白质浓度标准功能测定、作为细胞营养素的功能以及在限制性消化过程中稳定酶的能力。然而,这里重要的一点是,当你只寻找其中一个或另一个时产品是,它们经常出现在谷歌,百度搜索中出现,而且听起来非常相似。