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EDTA(二钠,溶液配制,溶解度,作用)

Release Time:2022-10-06

EDTA作用:
※ EDTA是一种化学螯合剂,可以螯合二价金属离子,如Ca2+和Mg2+。
※ EDTA溶液也称为Versene溶液。由于Ca2+和Mg2+是细胞膜的重要组成部分,具有凝集细胞的功能,EDTA可以破坏细胞之间的连接,促进细胞分裂为单个细胞。
※ EDTA毒性较小,价格低廉,使用方便,并且不会破坏细胞表面分子。
※ EDTA只与Ca2+和Mg2+结合,因此适用于需要检测细胞表面分子的细胞消化。它还经常与胰蛋白酶溶液按一定比例混合。
※ EDTA产品:液体浓度:0.02%pH:7.2-7.4酚红:阴性溶剂:10mM PBS EDTA:0.2g/L储存:2-8°C装运:RT有效期:18个月。

EDTA溶液配制步骤:
如果你想配制1L,0.2%EDTA溶液,取800ml。
1. 添加EDTA.2Na。2H2O(见表)。
2. 将烧杯放在带有磁性颗粒的磁力搅拌器上。保持pH探针监测pH值。
3. 加入75%的NaOH颗粒(以20g/L为基础计算粗制量,制成0.5M)。
4. 让氢氧化钠完全溶解。同时检查二水EDTA二钠的溶解情况。
5. 依次加入其余的氢氧化钠颗粒。不要试图一次添加大量内容。你可能会超过pH值。
6. EDTA完全溶解后,检查pH值。必要时使用HCl。
7. 将溶液转移到量筒中并调整体积。
8. 通过过滤器灭菌(0.22微米)或高压灭菌进行灭菌。
摩尔浓度 100 ml 250 ml 500 ml 1000 ml
100 mM 3.72 g 9.30 g 18.61 g 37.22 g
0.25 M 9.31 g 23.26 g 46.53 g 93.06 g
0.5 M 18.61 g 46.53 g 93.06 g 186.12 g

EDTA用途:
1. 在化学水平上,EDTA 与金属离子形成配位化合物,从而使它们失活。
2. 生物化学家使用EDTA用于提高或降低酶的活性。
3. 无机化学家使用它作为化学缓冲液。
4. EDTA(钠钙EDTA)的变体用于治疗铅(Pb)和汞(Hg)中毒。
5. EDTA还可用作加工食品和化妆品的防腐剂。
6. TAE、TBE、DNA负载染料、Tris-EDTA、胰蛋白酶EDTA的成分。
EDAT用途的案例:
1. 
提高或降低酶的活性案例:
DNA聚合酶的活性需要Mg2+。溶液中存在EDTA会导致Mg2+的隔离。这最终使Mg2+无法用于DNA聚合酶,从而降低其活性。EDTA的螯合性能在DNA分离时是一个优势(降低DNA酶活性以防止DNA降解),而在PCR中是一个劣势(需要DNA聚合酶活性)。
2. 提高酶的活性案例:
胰蛋白酶EDTA用于通过破坏细胞间基质,从贴壁细胞培养物中制备单细胞悬浮液(去除电镀细胞)。钙和镁离子可增强细胞间粘附。胰蛋白酶混合物中存在EDTA,可以隔离增强基质的离子。捕获这些离子会削弱相互作用并促进胰蛋白酶消化。
3. EDTA溶解度.
对于大多数应用,EDTA.2Na。使用pH 8.0的2H2O溶液。EDTA在中性pH下的溶解度很低,因此必须将溶剂(H2O)的pH值提高到8才能增加溶解度。
用于制备0.5M EDTA.2Na。2H2O溶液,大约需要20g NaOH。您可以以颗粒形式添加NaOH或10N NaOH溶液。如果pH过高,则使用HCl。
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