凝胶电泳和SDS-PAGE之间的区别
Release Time:2022-09-27凝胶电泳与SDS Page的主要区别
凝胶电泳是一种在电场中分离大分子的技术。 分子生物学中常用的方法是根据分子大小从混合物中分离 DNA、RNA 和蛋白质。 SDS Page 是一种凝胶电泳,用于根据蛋白质的大小从蛋白质混合物中分离蛋白质。 凝胶电泳是一个术语,用于指用于 DNA、RNA 和蛋白质分离的常规技术,而 SDS 页是一种凝胶电泳。 这是凝胶电泳和 SDS Page 之间的主要区别。
什么是凝胶电泳?
凝胶电泳是实验室中用于从混合物中分离带电分子(如 DNA、RNA、蛋白质等)的常用技术。凝胶用于凝胶电泳。它充当分子筛。凝胶电泳中使用两种类型的凝胶,即琼脂糖和聚丙烯酰胺。凝胶和凝胶制剂的选择是凝胶电泳中要考虑的重要因素,因为应仔细控制凝胶的孔径,以便通过凝胶电泳实现分子的良好分离。凝胶电泳具有连接到凝胶两端的电场。凝胶的一端带正电荷,而另一端带负电荷。
DNA 和 RNA 是带负电荷的分子。一旦它们从凝胶的负端加载到凝胶中并施加到电场中,它们就会通过凝胶孔迁移到凝胶的带正电端。迁移的速度取决于分子的电荷和大小。较小的分子比较大的分子更容易通过凝胶孔迁移。因此,较小的分子在凝胶中行进很长的距离,而较大的分子则在很短的距离内行进。为了观察分子在凝胶上的移动,使用了特殊类型的染料。电场施加一定时间后停止,以防止分子丢失并使分子保持在其行进位置。在凝胶中可以观察到不同的条带。这些条带代表不同大小的分子。因此,凝胶电泳可用于根据分子大小区分分子。
凝胶电泳作为分子生物学中的一种制备技术被纳入各种技术中,例如 PCR、RFLP、克隆、DNA 测序、Southern 印迹、基因组作图等。
图 1:琼脂糖凝胶电泳
什么是SDS Page?
十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS Page)是一种用于分离蛋白质的凝胶电泳。当使用凝胶电泳分离蛋白质时,需要进行特殊处理,因为蛋白质不像 DNA 和 RNA 那样带负电,也不会向正端或负端迁移。因此,在凝胶电泳之前,蛋白质会变性并带有负电荷。它是使用一种称为十二烷基硫酸钠 (SDS) 的清洁剂来完成的。使用 SDS 和聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的凝胶电泳称为SDS Page。这种技术常用于生物化学、遗传学、法医学和分子生物学。
在SDS Page,蛋白质与 SDS混合。 SDS 将蛋白质展开成线性形状,并用与其分子量成正比的负电荷包裹它们。由于负电荷,蛋白质分子向凝胶的正电荷端迁移并根据它们的分子量分离。在SDS Page中,聚丙烯酰胺用作凝胶的固体支持物。蛋白质的实际分离主要取决于凝胶的性质。因此,应仔细制备聚丙烯酰胺凝胶,并应使用正确浓度的聚丙烯酰胺。聚丙烯酰胺凝胶比琼脂糖凝胶具有更高的分辨率。因此,SDS Page 被认为是一种用于蛋白质分离的高分辨率技术。
SDS Page 是一种变性凝胶电泳。它在蛋白质分析方面有很大的局限性。由于 SDS 在分离之前使蛋白质变性,因此不允许检测酶活性、蛋白质结合相互作用、蛋白质辅助因子等。
凝胶电泳和 SDS Page 有什么区别?
凝胶电泳与SDS Page总结
凝胶电泳是基于 DNA、RNA 和蛋白质的大小和电荷分离和分析的常用技术。 凝胶电泳主要有两种类型,即琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。 琼脂糖凝胶主要用于核酸分离; 当需要更高的分辨率时,可以使用聚丙烯酰胺凝胶。 SDS Page 是一种凝胶电泳,通常用于分离复杂的蛋白质混合物。 它被认为是一种高分辨率的蛋白质分离技术。 这就是凝胶电泳和 SDS Page 的区别。
文献:
1. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig, and David H. Petering. “Native SDS-PAGE: High Resolution Electrophoretic Separation of Proteins With Retention of Native Properties Including Bound Metal Ions. www.ncbi.nlm.nih.gov. N.p., May 2014. Web. 7 Apr. 2017
2. Stellwagen, Nancy C. “Electrophoresis of DNA in agarose gels, polyacrylamide gels and in free solution.” Electrophoresis. U.S. National Library of Medicine, June 2009. Web. 07 Apr. 2017