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蛋白酶抑制剂介绍：
蛋白酶抑制剂是一种化合物，用于保护蛋白质样品免受蛋白酶的消化功能，蛋白酶的消化功能在分离过程中被触发。因此，它们用于保护细胞裂解物和蛋白质样品免于迫在眉睫的自然降解。
蛋白酶抑制剂可以根据它们作用的蛋白酶类型（天冬氨酸、半胱氨酸、金属蛋白酶、丝氨酸、苏氨酸和胰蛋白酶）或其作用机制进行分类。然而，在众多可用的蛋白酶抑制剂中，不可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂 PMSF（苯甲基磺酰氟）和 AEBSF（4-（2-氨基乙基）-苯磺酰氟盐酸盐）是制备大多数均质缓冲液中常用的蛋白酶抑制剂。

这样做的原因是简单的。在大多数细胞和组织中发现的大多数蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶组（糜蛋白酶、激肽释放酶、纤溶酶、蛋白酶 K、凝血酶和胰蛋白酶），需要使它们失效以确保令人满意的蛋白质纯化产量。

PMSF 的作用是通过酯化过程使丝氨酸羟基和任何其他在其活性位点含有丝氨酸的酶失活。但是，如果需要维持这种酶的生物活性，则应考虑使用其他类型的丝氨酸蛋白酶抑制剂，例如 AEBSF、抑肽酶或苯甲脒。

另一方面，金属蛋白酶最好通过使用螯合金属蛋白酶活性所需的金属离子的 EDTA 来灭活。也可以使用其他经典的锁和钥匙抑制剂，例如 bestatin 和其他蛋白质抑制剂，例如 α-2 巨球蛋白。其他蛋白酶可能不太重要，但如果您想从检测中获得准确的结果，它们同样应该失效。
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蛋白酶抑制剂如何起作用？
蛋白酶抑制剂通过与活性位点结合或通过改变其结构来可逆或不可逆地使存在于细胞裂解物中的蛋白酶失活而起作用。这些操作中的任何一个都将防止蛋白质样品的水解，并允许您将裂解物储存更长的时间而不会在此过程中降解。
然而，由于没有一种化学物质可以有效地使每种已知的蛋白酶失活，因此大多数研究人员更喜欢使用即用型“鸡尾酒”或制备自己的几种抑制剂化合物的混合物，以防止蛋白水解并保护蛋白质提取物免于降解。

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