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DAPI(介绍,染色步骤,染色,毒性)

Release Time:2022-06-07

DAPI 介绍:
DAPI (DAPI化学名:4',6-diamidino-2-phenylindole) 是一种 DNA 特异性探针,DAPI 是一种荧光染料,通过附着在富含 A-T 的 DNA 序列的小树林中形成荧光复合物。 DAPI 还可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合进而发挥出生物标记的作用,可以产生比 DAPI 本身 强约 20倍的荧光。 与EB(溴化乙啶)相比较,DAPI 对双链DNA的染色灵敏度高很多倍。显微镜下可以看出显蓝色荧光的细胞。DAPI 可作为 DNA 特异性探针在组织化学和生物化学中用于流式细胞术、染色体染色、DNA 可视化和定量的应用。

 
DAPI染色原理:
DAPI 是一种可以与 DNA 进行强力结合的最常用的荧光染料。DAPI 结合至双链 DNA小沟 的AT碱基对位置,一个 DAPI分子 可占据约三个碱基对位置。结合到 双链DNA 上的 DAPI分子 后的荧光强度大约可提高20倍,一般采用荧光显微镜进行观测即可,依据荧光强度可以确定出DNA的量。此外,因 DAPI 可透过完整的细胞膜,也可用于 活细胞 和固定细胞的染色。在荧光显微镜下进行观察,DAPI染料 是利用紫外光波长的光线进行激发。单独 DAPI 的最大吸收波长是340nm,DAPI的最大发射波长是488nm;当 DAPI 与 双链DNA 进行结合,DAPI的最大吸收和发射波长分别为:364nm,454nm(10 mM Tris pH7.0,100 mM NaCl,10 mM EDTA),其发散光的波长范围含盖了蓝色至青绿色。DAPI也可与RNA进行结合,但产生的荧光强度只有约为DNA结合的荧光强度的1/5,其发散光的波长范围约在500nm左右。

DAPI染色步骤:
DAPI的染色步骤见链接:

《怎么使用DAPI进行染色》
http://www.bio-fount.com/cn/content/427.html


 

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