钙指示剂(Calcium Indicators)
Release Time:2022-02-16钙指示剂(Calcium Indicators)种类:
BIOFOUNT 开发了钙指示剂系列探针,包括 Fluo-8®、Cal-520® 和 Calbryte™ 钙指示剂,以及钙通量测定,以通过强荧光信号和多种波长选项跟踪钙动员 从紫外线到红外线。
用于活细胞钙成像的荧光AM酯衍生物指示剂:
在结合钙时显示光谱响应的荧光指示剂使研究人员能够通过使用荧光显微镜、流式细胞术、荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离钙浓度的变化。为了便于检测细胞内钙动员并促进被动扩散,乙酰氧基甲酯 (AM 酯) 官能团附着在钙指示剂的核心结构上。这增加了指示剂的疏水性,使其能够轻松穿透完整的质膜,并通过最大限度地减少非特异性背景荧光来提高指示剂的灵敏度,因为 AM 酯共轭指示剂基本上是非荧光和无活性的。
一旦探针进入活细胞并且只有在细胞内酯酶去除 AM 酯官能团后,活性才开始。一旦被激活,探针通过螯合检测钙,并通过产生与钙浓度相关的荧光信号来响应。 Fluo-8®, AM (Cat No.HCM0029B), Cal-520®, AM (Cat No.HCQ000597) 和 Calbryte™ 520, AM () 等指示剂已广泛用于钙成像、钙通量用于药物发现的检测和基于细胞的高通量筛选 (HTS) 检测。钙指示剂与流式细胞仪、荧光显微镜和荧光微孔板平台兼容。除了提供荧光和发光钙指示剂外,我们还提供多种非荧光钙信号分子和螯合剂,用于测量和操纵细胞内和细胞外钙。
单波长钙指示剂
单波长钙指示剂广泛用于监测钙动员、钙信号的空间动力学成像,以及通过 GPCR 对激动剂刺激和拮抗剂抑制的信号进行基于 HTS 细胞的药理学筛选。 这些指标在饱和钙水平下表现出显着的钙依赖性变化,而不会改变它们的吸光度或发射波长。 我们开发了多种新型钙指示剂,包括 Fluo-8® 系列、Cal-520® 系列和 Calbryte™ 系列,旨在通过最亮的荧光信号以及一系列波长和亲和力选项来追踪钙动员 满足很多应用。
单波长钙指示剂的主要特点
※ 改进的信号背景比。
※ 大大增强细胞保留。
※ 用于活细胞钙分析的细胞渗透形式(与成像、流式细胞术和微孔板测定兼容,例如 HTS)。
※ 用于通过显微注射、贴片吸管或胞饮加载加载的细胞不渗透形式。
※ 紫外 (UV)、紫罗兰色和可见光可激发格式。
※ 低、中和高亲和力格式提供了满足许多应用的灵敏度范围。比例钙指标
图-1.HeLa cells loaded with Fluo-4 in the presence (+) or the absence (-) of 500 nM of the Ca²? ionophore ionomycin.
双波长钙指示剂(Ratiometric Calcium Indicators):
双波长指示剂 与单波长指示剂相比,双波长指示剂 具有独特的光谱特性,可响应结合钙而触发。当与钙结合时,比率指示剂的最佳吸光度或发射波长强度会发生变化。例如,双激发钙指示剂 Fura-2、AM 和 Fura-8™、AM 在结合或不含钙时表现出两个峰值激发波长。当分别在钙结合和无钙峰值激发波长下激发时,钙浓度的增加会导致双激发指示剂的荧光发射强度增加和减少。
双波长指示剂的主要特点
※ 双波长测定可准确测量细胞内钙浓度;
※ 最大限度地减少不均匀染料加载、染料泄漏、光漂白和不同细胞厚度的影响(在混合群体中很常见);
※ 提供更可靠和可重复的结果;
※ 可作为透膜 AM 酯(与成像、流式细胞术和微孔板检测兼容,例如 HTS);
※ 可作为不透膜盐衍生物,通过显微注射、贴片吸管或胞饮加载加载。