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花青素(Cyanines)系列染料

Release Time:2022-02-15

花青素(Cyanines)染料介绍:

花青素(Cyanines)是在两个具有离域电荷的氮原子之间含有聚甲炔桥的分子:花青素(Cyanines)染料主要用于通过光学方法监测细胞、细胞器和囊泡中的膜电位差。用于通过光学方法监测细胞、细胞器和囊泡中的膜电位差。这些对电位敏感的染料在分子结构、电荷和通过膜的渗透性方面有所不同。根据染料的不同,涉及到与膜的电位依赖性结合以及二聚体和更高聚集体的形成。

由于其结构,花青素具有非常高的消光系数,通常超过 100,000 Lmol-1cm-1。不同的取代基可以控制发色团的特性,例如吸收波长、光稳定性和荧光。例如,吸光度和荧光波长可以通过选择聚甲炔桥长度来控制:较长的花青素具有较高的吸光度和发射波长,直至近红外区域。

许多花青素染料已用于生命科学应用。一系列噻唑和恶唑染料已被用作 DNA 和蛋白质结合染料(如 TOTO、YOYO、Stains All 等)。但最流行的用于生命科学研究的花青染料是由卡内基梅隆大学的 Alan Wagoner 及其同事在 1990 年代初推出的。这些染料是对自 1970 年代以来用于血管造影的花青染料吲哚菁绿 (ICG) 的改进,它们都含有两个位于聚甲炔链两侧的吲哚啉环。发现这些染料对生物分子的非特异性结合较低,并且由于其巨大的消光系数和良好的量子产率而具有明亮的荧光。一旦获得专利,这些分子在 CMU 专利到期后现在处于公共领域,并且可以从 Lumiprobe 购买,作为各种反应性衍生物进行研究和商业用途,例如 NHS 酯、马来酰亚胺、用于点击化学的叠氮化物和其他衍生物。
花青素染料有两种:非磺化花青和磺化花青。对于许多应用,它们是可以互换的,因为它们的光谱特性几乎相同。磺化和非磺化染料均可用于标记生物分子,例如 DNA 和蛋白质。染料之间的区别在于它们的溶解度:磺基染料是水溶性的,它们在水性环境中不使用有机助溶剂进行标记。它们在水中不易聚集。在某些情况下,需要一种花青(参见下面的磺化与非磺化花青素部分)。
 
非磺化花青素
可用的非磺化染料包括 Cy3、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7 和 Cy7.5。 Cy® 代表“花青”,第一个数字表示二氢吲哚基团之间的碳原子数。 Cy2 是恶唑衍生物而不是吲哚宁,是该规则的一个例外。 后缀 0.5 用于苯并稠合花青。 结构的变化可以改变分子的荧光特性,并用几种荧光团覆盖可见光和近红外光谱的最重要部分。

大多数非磺化花青素的衍生物(酰肼和胺的盐酸盐除外)的水溶性较低。 当这些分子用于生物分子标记时,需要使用有机助溶剂(5-20% 的 DMF 或 DMSO)以实现有效反应。花青素染料应先溶解在有机溶剂中,然后加入生物分子(蛋白质、肽、氨基标记的DNA)在适当的水性缓冲液中的溶液中。 当偶联有效发生时,染料会在沉淀之前发生反应。

非磺化花青素的荧光性质对溶剂和周围环境的依赖性很小。
磺化花青素

磺化花青素包括额外的磺基,其有助于染料分子在水相中的溶解。 带电荷的磺酸盐基团可减少染料分子和重标记缀合物的聚集。
目前可用的磺化花青包括磺基-Cy3、磺基-Cy5和磺基-Cy7。

磺化花青素是高度水溶性的。 使用这些试剂进行标记不需要有机助溶剂。
花青素(Cyanines)染料产品
 
Cy3.5参数
  激发峰(Ex) 发射峰(Em) 消光系数(εmax) 量子产率(Φ)
非磺化Cy3 555nm 570nm 150000 0.31
磺化Cy3 550nm 564nm 162000 0.1

Cy3系列产品:
荧光母核 标记对象 荧光染料产品
sulfo-Cy3 NHS ester Sulfo-Cyanine3 NHS ester
maleimide Sulfo-Cyanine3 maleimide
azide Sulfo-Cyanine3 azide
alkyne Sulfo-Cyanine3 alkyne
carboxylic acid Sulfo-Cyanine3 carboxylic acid
Cy3 NHS ester Cy3 NHS ester
maleimide Cy3 maleimide
azide Cy3 azide
alkyne Cy3 alkyne
hydrazide Cy3 hydrazide
amine Cy3 amine
carboxylic acid Cy3 carboxylic acid

Cy3.5参数表
  激发峰(Ex) 发射峰(Em) 消光系数(εmax) 量子产率(Φ)
Cy3.5 586nm 606nm 116000 0.35
磺化Cy3.5 584nm 604nm 116000 0.35

Cy3.5系列产品:
荧光母核 标记对象 荧光染料产品
Cy3.5 NHS ester Cy3.5 NHS ester
azide Cy3.5 azide
carboxylic acid Cy3.5 carboxylic acid

Cy5参数表
  激发峰(Ex) 发射峰(Em) 消光系数(εmax) 量子产率(Φ)
Cy5 640nm 664nm 250000 0.2
磺化Cy5 649nm 672nm 271000 0.28

Cy5系列产品:
 
荧光母核 标记对象 荧光染料产品
sulfo-Cy5 NHS ester Sulfo-Cyanine5 NHS ester
maleimide Sulfo-Cyanine5 maleimide
azide Sulfo-Cyanine5 azide
alkyne Sulfo-Cyanine5 alkyne
carboxylic acid Sulfo-Cyanine5 carboxylic acid
Cy5 NHS ester Cy5 NHS ester
maleimide Cy5 maleimide
azide Cy5 azide
alkyne Cy5 alkyne
hydrazide Cy5 hydrazide
amine Cy5 amine
carboxylic acid Cy5 carboxylic acid

Cy5.5参数表
  激发峰(Ex) 发射峰(Em) 消光系数(εmax) 量子产率(Φ)
Cy5.5 680nm 698nm 209000 0.2
磺化Cy5.5 678nm 706nm    

Cy5.5 系列产品:
荧光母核 标记对象 荧光染料产品
Cy5.5 NHS ester Cy5.5 NHS ester
maleimide Cy5.5 maleimide
azide Cy5.5 azide
alkyne Cy5.5 alkyne
hydrazide Cy5.5 hydrazide
amine Cy5.5 amine
carboxylic acid Cy5.5 carboxylic acid
 
Cy7参数表
  激发峰(Ex) 发射峰(Em) 消光系数(εmax) 量子产率(Φ)
Cy7 740nm 770nm 199000 0.3
磺化Cy7 748nm 774nm 240600 -/-

Cy7系列产品:
荧光母核 标记对象 荧光染料产品
sulfo-Cy7 NHS ester sulfo-Cy7 NHS ester
azide sulfo-Cy7 azide
amine sulfo-Cy7 amine
carboxylic acid sulfo-Cy7 carboxylic acid
Cy7 NHS ester Cy7 NHS ester
maleimide Cy7 maleimide
azide Cy7 azide
alkyne Cy7 alkyne
hydrazide Cy7 hydrazide
amine Cy7 amine
carboxylic acid Cy7 carboxylic acid

Cy7.5参数表
  激发峰(Ex) 发射峰(Em) 消光系数(εmax) 量子产率(Φ)
Cy7.5 788nm 808nm 223000  

Cy7.5系列产品:
荧光母核 标记对象 荧光染料产品
Cy7.5 NHS ester Cy7.5 NHS ester
maleimide Cy7.5 maleimide
azide Cy7.5 azide
alkyne Cy7.5 alkyne
hydrazide Cy7.5 hydrazide
amine Cy7.5 amine
carboxylic acid Cy7.5 carboxylic acid
 
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