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慢速响应型探针（Slow response probes）
Release Time：2022-02-10慢速响应型探针
慢速响应型探针（Slow-Response Probes ）对膜电位的反应主要通过改变探针分子在膜表面的富集与分布，因此 慢速响应型探针 对膜电位的反应较慢，往往需至少数十毫秒。但是 慢速响应型探针 对膜电压的反应较灵敏，荧光变程可以达到100%每100 mV。由于对电压的灵敏度高，慢响应探针可以检测到未极化的普通细胞膜表面的电压变化，比如离子通道活动，药物受体结合等引起的细微膜电压改变。根据探针的化学结构，慢响应探针可分为碳链花青类 （Carbocyanine）探和罗丹明类（rhodamines）探针和oxonol类探针。
羰花青 (Carbocyanine)
DiI、DiS 和 DiO 衍生物，羰花青类 (Carbocyanine)具有短烷基尾（<7 个碳原子）的 Indo- (DiI)、thia- (DiS) 和 oxa- (DiO) 碳花青，是最早开发出来的膜电压探针。由于碳链和疏水性，这类探针富集在膜表面甚至嵌入到膜当中，对膜电压变化的反应程度主要取结于探针染料的浓度和探针化学结构。碳链花青类探针可同时探测细胞质膜和线粒体膜的电压，但是往往对线粒体膜的电压变化更灵敏。因此，如果需要探测线粒体的膜电压，务必只使用极低的浓度（<100 nM），来降低细胞质膜和其他细胞器膜的干扰。
DiOC6(3) 和 DiOC5(3) 是用于膜电位测量的最广泛使用的羰花青染料。
| 光色 | 探针名称 | 同义名称 | 激发波长/发射波长(nm) | 产品货号 |
|---|---|---|---|---|
| DiOC2(3) | MitoProbe DiOC2(3) | 482/497 | ||
| DiOC5(3) | 482/504 | HCT012267 | ||
| DiOC6(3) | 482/504 | |||
| DiSC3(5) | 651/675 | |||
| DiIC1(5) | MitoProbe DiIC1(5) | 640/657 |
罗丹明 123、TMRM 和 TMRE
罗丹明 123 被广泛用作线粒体的结构标记物和线粒体活性的指示物。通过将细胞外 K+ 浓度设置为接近细胞内值 (~137 mM) 来获得线粒体的高选择性、电位依赖性染色，从而使质膜去极化。
TMRM 和 TMRE ，四甲基罗丹明的甲酯和乙酯与罗丹明 123 密切相关。它们主要是线粒体膜电位传感器。这些阳离子染料在线粒体中的积累会导致荧光减弱，因为自淬火。 TMRM 和 TMRE 比罗丹明 123 更快地穿过质膜，并且它们的强荧光允许使用低浓度的探针，从而避免聚集。因为它们的荧光对环境相对不敏感，TMRM 和 TMRE 的空间分辨荧光呈现出它们跨膜分布的无偏分布，可以通过 Nernst 方程与质膜电位直接相关。影响活细胞中线粒体膜电位的药物的通量筛选测定。
Oxonols
Oxonol V and Oxonol VI
通过从细胞外溶液中的能斯特平衡依赖性摄取而积聚在去极化细胞的细胞质中。它们在水和膜之间的电压依赖性分配通常通过吸收而不是荧光来测量。
此外，oxonol VI 比 oxonol V 对电位变化的反应更快，因此被认为是测量快速电位变化的更好探针。
