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从细胞中提取胆固醇和脂质

Release Time:2019-12-14
      一种可能不适用于所有细胞/组织样品的通用方法-调整每细胞数量的溶剂量,离心时间和超声处理可能适用于难以破坏的样品。 对于氯仿-在化学安全罩下操作。
  • 将1 x 10e6细胞或?10 mg组织匀浆为200 uL氯仿-甲醇(v / v 2:1)或200 uL己烷-异丙醇(v / v 3:2)。
  • 在微量离心机中以14,000 rpm离心5-10分钟。
  • 将有机相转移至干净的试管中并真空干燥。 将物料存放在冷冻室(<20oC)中,进行干燥并避免空气污染,即在厌氧条件下将氧化减至最低。
  • 使用前,将真空干燥的脂质/胆固醇重新溶解在合适的测定缓冲液中。
参考文献:FOLCH J, LEES M, SLOANE STANLEY GH A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues. J Biol Chem (1957) pmid:13428781
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